Enterobacter aerogenes i druge vrste Enterobacteriaceae lako je identificirati pomoću API-20E test kompleta. Ovaj komplet, proizveden od strane bioMeriuex Inc., uključuje 20 mini cijevi ili jažica za ispitivanje. Test se sastoji od inokulacije čiste bakterijske suspenzije u ispitne jažice i očitavanja reakcija boje koje se javljaju. Identifikacija se oslanja na pretvaranje rezultata ovih reakcija u boju u sedmeroznamenkasti kod poznat kao indeks analitičkog profila. Usklađivanje ovog koda s bazom podataka proizvođača omogućuje identifikaciju organizma.
Otvorite ampulu koja sadrži 5 ml natrijevog klorida s 0,85 posto medija. Pipetom izvadite jednu koloniju sa izolacijske ploče stare 18 do 24 sata i dodajte je u ampulu. Pomiješajte da se dobije homogena suspenzija. Koristite ovu suspenziju čim je završite s pripremom.
Postavite kutiju za inkubaciju koja se sastoji od saćanih zdenaca u pladnju s poklopcem. Otvorite kutiju i dodajte 5 ml demineralizirane ili destilirane vode u jamice ladice. Raspakirajte traku priloženu u testnom priboru API 20E i stavite je u kutiju za inkubaciju.
Napunite pripremljenu suspenziju epruvete i čašice jažica s oznakama "GEL", "VP" i "CIT". U preostale jažice napunite bakterijsku suspenziju u epruvetu, ali ne u kupulu. Dodajte mineralno ulje u jažice s oznakama "ADH", "ODC", "LDC", "URE" i "H2S" da biste stvorili anaerobno okruženje.
Pokrijte kutiju za inkubaciju poklopcem i inkubirajte na temperaturi između 34 i 38 Celzijevih stupnjeva 18 do 24 sata.
Promatrajte jamice i zabilježite reakcije na listu rezultata. Pod uvjetom da su najmanje tri testa pozitivna, prijeđite na reakcije boje koristeći kemijske otopine za ispitivanje ili reagense koje ste dobili s kompletom. Dodajte jednu kap TDA reagensa u dobro označenu "TDA" i kap svakog reagensa VP1 i VP2 u dobro označene "VP". Ako je manje od tri testa pokazalo pozitivnim, inkubirajte trake još 24 sata prije nego što ih dodate reagensi.
Promatrajte promjene boje nastale u jamicama. Crvenkasto smeđa boja u TDA ukazuje na pozitivnu reakciju. Pričekajte 10 minuta nakon dodavanja reagensa iz kompleta u VP1 i VP2. Crvenu ili ružičastu boju smatrajte pozitivnom, a blijedo ružičastu koja se nakon 10 minuta pojavila negativnom.
Izvršite test oksidaze kako je odredio proizvođač kompleta i zabilježite njegove rezultate zajedno s rezultatima prethodnih 20 ispitivanja.
Unesite ovaj sedmeroznamenkasti broj profila u bazu podataka proizvođača kompleta putem dodirnog telefona. Pričekajte da primite identifikaciju koju pruža baza podataka. Ako broj profila ne daje određene rezultate, provedite dodatna ispitivanja koja je odredio proizvođač kompleta.