फ्लो साइटोमेट्री परिणामों को कैसे समझें

प्रयोग के उद्देश्य को यह पूछकर स्पष्ट करें, "क्या प्रश्न या परिकल्पना की जांच की जा रही थी?" यह होगा सांख्यिकीय साइटोमेट्री का उपयोग करके आगे के विश्लेषण के लिए कच्चे परिणामों को उपयुक्त प्रारूप और सेटिंग्स में समायोजित करने के लिए आवश्यक है सॉफ्टवेयर। प्रासंगिक सेटिंग्स (जैसे सकारात्मक कोशिकाओं, नकारात्मक द्वार, प्रतिदीप्ति तीव्रता, सेल आबादी आदि) के साथ डेटा प्रदर्शित करने के लिए जो भी परिवर्तन आवश्यक हैं, करें।

फाटकों का पता लगाएं। कोशिकाओं को समूहीकृत किया जा सकता है या बस एक घनत्व प्लॉट या समोच्च आरेख पर एक साथ क्लस्टर किया जा सकता है। समूह अक्सर अपनी पहचान के आधार पर अलग हो जाते हैं। यदि एक समूह किसी विशेष मार्कर या एंटीबॉडी के लिए बहुत तीव्रता से दाग लगाता है, तो यह निष्कर्ष निकाला जाता है कि उस समूह के सभी सदस्यों के पास विशिष्ट सेल-प्रकार की पहचान होती है, जो उस मार्कर को व्यक्त करती है। इन मार्करों में से एक से अधिक के लिए सकारात्मक कोशिकाओं को ढूंढना आम बात है, और ये कोशिकाएं आमतौर पर एक मध्यवर्ती होती हैं और इसे "डबल पॉजिटिव" के रूप में दर्शाया जाता है।

स्कैटरग्राफ देखें। जिस तरह से कोशिकाओं के समूह एक तितर बितर भूखंड में फैलते हैं, वह कोशिकाओं के आकार का एक संकेत है। बहुत बड़े या उच्च प्रकीर्णन वाली कोशिकाएँ आमतौर पर बड़ी कोशिकाएँ होती हैं; हालांकि, वे बड़े हो सकते हैं क्योंकि उनमें साइटोप्लाज्म का उच्च अनुपात होता है, या वे उच्च हो सकते हैं क्योंकि उनके पास एक बहुत बड़ा नाभिक होता है। जीव विज्ञान की जांच के आधार पर, यह निश्चित रूप से प्रयोगों के बीच व्यापक रूप से भिन्न होगा।

संख्याओं को देखो। वाई-अक्ष पर गिनती रखते हुए एक अक्ष (आमतौर पर एक्स-अक्ष) पर विभिन्न पैरामीटर प्रदर्शित करने के लिए भूखंडों को समायोजित करें। यह नमूना आबादी के अनुपात को इंगित करता है जो उस विशेष पैरामीटर के लिए सकारात्मक हैं, जैसे कि a शिखर आम तौर पर एक सकारात्मक दाग वाले नमूने में देखा जाएगा, जो नकारात्मक नियंत्रण से अनुपस्थित होगा नमूना।

बहु-पैरामीटर हिस्टोग्राम देखें। प्रत्येक के लिए एक्स-अक्ष और वाई-अक्ष को समायोजित करके एक अलग पैरामीटर का प्रतिनिधित्व किया गया था प्रयोग के दौरान जांच की गई, तो गुणों की गहरी समझ प्राप्त करना संभव है नमूने का। उदाहरण के लिए, एक्स-अक्ष को लाल फ्लोरेसेंस और वाई-अक्ष को हरे रंग के फ्लोरेसेंस पर सेट करके, क्वाड्रेंट-स्टाइल गेट्स की गणना की जा सकती है एक चतुर्थांश के चार क्षेत्रों को दिखाने के लिए नमूना जिसमें कोशिकाएं मौजूद हैं और लाल या हरे रंग की प्रतिदीप्ति के लिए दागदार हैं, दोनों रंग, या कोई भी नहीं सब। यह एक विषम नमूने को उसके घटक भागों में विभाजित करने की अनुमति देता है और किसी भी अतिव्यापी संस्थाओं को देखने के साथ-साथ परिमाणित भी किया जा सकता है।

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