एक बार जब आप एक agarose जेल पर डीएनए नमूने चलाते हैं और एक तस्वीर लेते हैं, तो आप बाद के लिए तस्वीर को सहेज सकते हैं, जिस बिंदु पर आप परिणामों का विश्लेषण कर सकते हैं और उनकी व्याख्या कर सकते हैं। आप जिस प्रकार की चीज़ों की तलाश कर रहे हैं, वह आपके प्रयोग की प्रकृति पर निर्भर करेगी। उदाहरण के लिए, यदि आप डीएनए फ़िंगरप्रिंटिंग कर रहे हैं, तो आप दो नमूनों से डीएनए के टुकड़ों के आकार की तुलना करना चाहेंगे - संदिग्ध से और अपराध स्थल के नमूने से, शायद। यदि आप बैक्टीरिया से प्लास्मिड के साथ काम कर रहे हैं, तो इसके विपरीत, आपको यह सुनिश्चित करने की आवश्यकता हो सकती है कि प्लास्मिड में सम्मिलित है। नतीजतन, आप अपने जेल की व्याख्या कैसे करते हैं, यह आपके द्वारा किए गए प्रयोग पर निर्भर करेगा। फिर भी, कुछ सामान्य नियम हैं जिन्हें आप लागू कर सकते हैं।
ध्यान दें कि आपको इस खंड के निर्देशों का उपयोग करने की आवश्यकता हो भी सकती है और नहीं भी। Agarose gel वैद्युतकणसंचलन का उपयोग अक्सर यह पुष्टि करने के लिए किया जाता है कि एक प्लास्मिड में एक दिया गया इंसर्ट होता है। यदि आप प्लास्मिड के साथ काम नहीं कर रहे हैं, तो आप इस अनुभाग को छोड़ सकते हैं। यदि आप हैं, हालांकि, आप इन निर्देशों का पालन कर सकते हैं।
ध्यान दें कि यदि आप बिना काटे या निकले हुए प्लास्मिड के साथ काम कर रहे हैं, तो आप उपरोक्त खंड 1 की प्रक्रिया का उपयोग करके आकार का अनुमान नहीं लगा सकते। ऐसा इसलिए है क्योंकि बिना कटे और निकले प्लास्मिड रैखिक डीएनए से अलग-अलग दरों पर पलायन करते हैं।
प्रत्येक लेन में बैंड की संख्या की तुलना करें। याद रखें कि एक प्रतिबंध एंजाइम उन साइटों पर डीएनए को काटता है जहां एक निश्चित अनुक्रम होता है जिसे प्रतिबंध स्थल कहा जाता है। यदि एक नमूने को दो प्रतिबंध एंजाइमों के साथ इलाज किया गया था, तो डालने के लिए एक बैंड और शेष प्लास्मिड के लिए एक बैंड दोनों मौजूद होना चाहिए। ऐसा इसलिए है क्योंकि सम्मिलन दो प्रतिबंध साइटों से घिरा होगा, प्रत्येक एक अलग एंजाइम के लिए, इसलिए इन दोनों साइटों पर कटौती प्लास्मिड से डालने को मुक्त कर देगी। इसके विपरीत, केवल एक साइट पर एक कट, प्लास्मिड को रैखिक डीएनए में बदल देगा। बिना किसी प्रतिबंध एंजाइम या एक प्रतिबंध एंजाइम के साथ काटे गए नमूने में एक बैंड होना चाहिए, जबकि दो प्रतिबंध एंजाइमों के साथ काटे गए नमूने में दो बैंड होने चाहिए।
निकेड प्लास्मिड डीएनए द्वारा बनाए गए बैंड देखें। एक निकला हुआ प्लास्मिड केवल एक ही स्ट्रैंड में कट होता है, इसलिए यह कटे हुए प्लास्मिड की तुलना में अधिक धीरे-धीरे माइग्रेट करता है। कटे प्लास्मिड बदले में बिना काटे डीएनए की तुलना में अधिक धीरे-धीरे पलायन करते हैं।
खंड 1 में वर्णित प्रक्रिया का उपयोग करके सम्मिलन के आकार का अनुमान लगाएं और निर्धारित करें कि क्या यह आपकी अपेक्षाओं से मेल खाता है (जो प्रयोग के आधार पर अलग-अलग होगा।)
चीजें आप की आवश्यकता होगी
- पेंसिल
- कागज़
- स्प्रेडशीट कार्यक्रम
- आपके जेल की तस्वीर
- शासक