डीएनए निष्कर्षण में इथेनॉल क्या करता है?

वैज्ञानिक डीएनए को उसके घटक न्यूक्लियोटाइड में तोड़ सकते हैं, या अनुक्रमित कर सकते हैं, जो उदाहरण के लिए, किसी व्यक्ति को बता सकते हैं कि क्या उन्हें आनुवंशिक बीमारी है। डीएनए निष्कर्षण के सामान्य तरीकों में प्रक्रिया के एक चरण में आइसोप्रोपेनॉल या इथेनॉल का उपयोग शामिल है। हालांकि, कोशिकाओं में प्रोटीन और लिपिड जैसे कई अन्य अणु होते हैं, और वैज्ञानिक स्वाभाविक रूप से डीएनए का एक समाधान प्राप्त करना चाहते हैं जो यथासंभव शुद्ध हो।

डीएनए निष्कर्षण के तरीकों में आम तौर पर कई चरण शामिल होते हैं: कोशिकाओं को खुले में तोड़ा जाना चाहिए, झिल्ली लिपिड को हटाने की जरूरत है, और डीएनए को प्रोटीन, आरएनए, और अन्य से अलग करने की जरूरत है संदूषक बैक्टीरियल प्लास्मिड डीएनए और फिनोल-क्लोरोफॉर्म निष्कर्षण के निष्कर्षण के लिए दो विशिष्ट प्रोटोकॉल क्षारीय लसीका हैं। दोनों तरीकों में, न्यूक्लिक एसिड का इथेनॉल या आइसोप्रोपेनॉल वर्षा अंतिम चरणों में से एक है। एक बार डीएनए या आरएनए अवक्षेपित हो जाने के बाद (समाधान से बाहर गिर गया), इसे पानी में फिर से निलंबित किया जा सकता है।

इथेनॉल और आइसोप्रोपेनॉल दोनों ही पानी के साथ अच्छी तरह से मिश्रित होते हैं (गलत तरीके से) पानी, लेकिन उनके पास पानी की तुलना में कम ढांकता हुआ स्थिरांक है जिसका अर्थ है कि समाधान में सकारात्मक और नकारात्मक चार्ज को ढालने और उन्हें अलग रखने की उनकी क्षमता बहुत अधिक है गरीब उदाहरण के लिए, पानी के लिए ढांकता हुआ स्थिरांक 78.5 है, जबकि इथेनॉल के लिए स्थिरांक 24.3 है। डीएनए नकारात्मक रूप से चार्ज होता है, इसलिए यह पोटेशियम या सोडियम जैसे समाधान में सकारात्मक आयनों की ओर आकर्षित होता है। धनावेशित आयनों और डीएनए को अलग रखने के लिए इथेनॉल में पानी की तुलना में खराब क्षमता होती है।

इथेनॉल एक अन्य कारण से भी डीएनए को कम घुलनशील बनाता है। चूंकि इथेनॉल अणु पानी के अणुओं के साथ हाइड्रोजन बांड नामक बातचीत बना सकते हैं, वे डीएनए को हाइड्रेट करने के लिए उपलब्ध पानी के अणुओं की संख्या को कम कर देते हैं। इस प्रभाव और निचले ढांकता हुआ स्थिरांक के बीच, इथेनॉल मूल रूप से डीएनए को समाधान में सकारात्मक आयनों के साथ एकत्रित करने का कारण बनता है, जिससे ट्यूब के नीचे एक ठोस या अवक्षेप बनता है। डीएनए का अवक्षेपण इसे और अधिक केंद्रित बनाने का कार्य करता है क्योंकि समाधान में अन्य संदूषक एक ही समय में अवक्षेपित नहीं होते हैं।

इथेनॉल वॉश लवण और डिटर्जेंट जैसे कम आणविक भार वाले दूषित पदार्थों को हटाने का भी काम करता है। चुना गया नमक इस आधार पर भिन्न हो सकता है कि सोडियम डोडेसिल सल्फेट (एसडीएस) डिटर्जेंट को पहले चरण से निकालना आवश्यक है या नहीं; उदाहरण के लिए, पोटेशियम डोडेसिल सल्फेट अघुलनशील है और अवक्षेपित हो जाएगा, इसलिए एक क्षारीय लसीका में पोटेशियम एसीटेट का उपयोग करने से इथेनॉल/आइसोप्रोपेनॉल जोड़ने से पहले एसडीएस को हटाया जा सकता है। इथेनॉल का उपयोग आरएनए को समान कारणों से करने के लिए भी किया जा सकता है, हालांकि आरएनए की वर्षा में आमतौर पर अधिक इथेनॉल की आवश्यकता होती है।