वायरस टाइटर्स की गणना कैसे करें

वायरस के लिए अनुमापांक की गणना करना यह कहने का एक जटिल तरीका है कि एक वैज्ञानिक किसी विशेष नमूने में वायरस की संख्या गिन रहा है। वायरस टाइटर्स की गणना करने के लिए, वैज्ञानिक अलग-अलग सांद्रता में वायरल समाधानों के साथ बढ़ते बैक्टीरिया की प्लेटों को संक्रमित करते हैं और वायरल के कारण मरने वाले बैक्टीरिया की गिनती करके मूल समाधान में वायरस की संख्या का पता लगाएं संक्रमण।

दस्तानों पर रखो, १० कल्चर ट्यूबों को ९ मिली शोरबा से भरें और उन्हें "10^-1," "10^-2", "10^-3," और लेबल करें। इसी तरह "10^-10" तक। इन ट्यूबों का उपयोग फेज की गणना के लिए उपयोग किए जाने वाले वायरल सीरियल कमजोर पड़ने के लिए किया जाएगा अनुमापांक चूंकि वायरस अविश्वसनीय रूप से उच्च सांद्रता तक बढ़ सकते हैं, इसलिए आपको उन्हें प्रभावी ढंग से गिनने के लिए उन्हें पतला करना होगा। प्रत्येक ट्यूब वायरस के दस गुना कमजोर पड़ने का प्रतिनिधित्व करती है।

अपनी ट्यूब से "10^-1" लेबल वाली मिश्रित कल्चर का 1 मिली लें और इसे "10^-2" लेबल वाली अगली ट्यूब में एक नए पिपेट के साथ स्थानांतरित करें। इस ट्यूब को भी मिला लें।

धारावाहिक कमजोर पड़ने की श्रृंखला बनाने के लिए इस पैटर्न को जारी रखें। आपको 9 मिली की 9 ट्यूब और 10 मिली की 1 ट्यूब मिल जाएगी। आपकी ट्यूब में वायरल लोड 10 गुना (आपकी पहली ट्यूब) या 100 गुना (आपकी दूसरी ट्यूब) से लेकर दस अरब गुना (आपकी अंतिम ट्यूब) तक कहीं भी पतला हो जाएगा।

अपने अगर में बैक्टीरियल कल्चर की दो बूँदें डालें और धीरे से मिलाएँ। ये वे बैक्टीरिया हैं जो मारे जाएंगे, जिससे आप किसी विशेष घोल में वायरस कणों की संख्या गिन सकते हैं।

प्रत्येक धारावाहिक कमजोर पड़ने के 1 मिलीलीटर को इसके संबंधित अगर ट्यूब में जोड़ें, जबकि ट्यूब अभी भी गर्म पानी के स्नान में हैं। उदाहरण के लिए, आपके 10^-1 सीरियल कमजोर पड़ने का 1 एमएल "10^-1" लेबल वाली अगर ट्यूब में जाना चाहिए।

प्रत्येक ट्यूब को मिलाएं और फिर प्रत्येक ट्यूब को संबंधित लेबल के साथ पेट्री प्लेट में डालें। यह अगर की एक पतली परत बनाएगा जिसे प्रत्येक प्लेट में बैक्टीरिया और वायरस से संक्रमित किया गया है। प्लेटों को एक मशीन में रात भर बढ़ने दें ।

अपनी प्लेटों को इनक्यूबेटर से बाहर निकालें और उनकी जांच करें। प्लाक कहे जाने वाले छोटे स्पष्ट धब्बों को छोड़कर, आपको पूरे प्लेट में बादल वाले क्षेत्रों को देखना चाहिए जहां बैक्टीरिया बढ़े हैं। ये प्लाक मृत बैक्टीरिया के पैच होते हैं, और प्रत्येक प्लाक एक वायरस का प्रतिनिधित्व करता है।

अपनी प्लेट में प्लाक की संख्या लें और 10 से गुणा करें। यदि आप 157 पट्टिकाओं की गिनती करते हैं, तो आपको 1570 मिलेंगे।

पिछले चरण में प्राप्त संख्या को अपनी तनु नली की संख्या के व्युत्क्रम से गुणा करें। उदाहरण के लिए, यदि आपके द्वारा चुनी गई प्लेट 10^-5 प्लेट थी, तो आप 1570000000 प्राप्त करने के लिए 1570 को 10^5 से गुणा करेंगे। यह अंतिम संख्या आपका फेज टिटर है, और आपकी मूल संस्कृति के प्रति मिलीलीटर वायरस की संख्या का प्रतिनिधित्व करती है।

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