मिश्रित संस्कृति में बैक्टीरिया को अलग करने की तकनीक

सूक्ष्म जीवविज्ञानी, आनुवंशिकीविद् और आणविक जीवविज्ञानी जीवन के रहस्यों की खोज के लिए जीवाणु संस्कृतियों का उपयोग करते हैं। माइक्रोबायोलॉजिस्ट संक्रमण के इलाज के लिए नई एंटीबायोटिक दवाओं की खोज के लिए बैक्टीरिया का अध्ययन करते हैं। आनुवंशिकीविद बैक्टीरिया का उपयोग यह निर्धारित करने के लिए करते हैं कि क्या रसायनों में कार्सिनोजेनिक गुण हो सकते हैं। आणविक जीवविज्ञानी कोशिकीय प्रक्रियाओं के जैवरासायनिक पथों का अध्ययन करते हैं ताकि हम उन एंजाइमों के कार्यों को समझ सकें जो बैक्टीरिया के साथ हमारे समान हैं। अध्ययन के रूप में विविध हैं, तीनों विज्ञान एक ही तकनीक का उपयोग करके जीवाणु संस्कृतियों को अलग करते हैं: अगर प्लेट स्ट्रीकिंग।

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सूक्ष्मजीव एकल-कोशिका वाले जीव हैं जैसे बैक्टीरिया और कवक। ये जीव जल्दी से प्रजनन करते हैं और बढ़ने में आसान होते हैं, जिससे उन्हें अध्ययन के लिए विशेष रूप से उपयोगी बना दिया जाता है। जब प्रकृति में एक संभावित नए सूक्ष्म जीव की खोज की जाती है, तो एक नमूने को "शोरबा" नामक विकास माध्यम में रखा जाता है। शोरबे निष्फल पानी, लवण, शर्करा और अन्य पोषक तत्वों से मिलकर बना होता है जो एक फ्लास्क में तेजी से बैक्टीरिया के विकास को बढ़ावा देगा ऊष्मायन। हालांकि, अधिक बार नहीं, शोरबा में एक से अधिक प्रकार के बैक्टीरिया होंगे। एक एकल जीवाणु को अलग करने के लिए, वैज्ञानिक "स्ट्रीकिंग" नामक एक माइक्रोबियल तकनीक का उपयोग करके एक अर्ध-ठोस अगर प्लेट पर शोरबा का एक छोटा सा नमूना फैलाएगा।

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अगर प्लेट्स अर्ध-पारदर्शी, अर्ध-ठोस जैल हैं जिनमें समुद्री शैवाल और पोषक तत्वों की विशिष्ट सांद्रता होती है। अगर की उपयोगिता इस तथ्य में निहित है कि यह बढ़ते बैक्टीरिया के लिए एक चिकनी, मुलायम सतह प्रदान करती है। जब कोई वैज्ञानिक एक जीवाणु को अग्र पर रखता है, तो वह हजारों बार अपने आप को दोगुना करके पुनरुत्पादित करेगा और एकल कोशिकाओं की एक छोटी कॉलोनी के रूप में प्रकट होगा।

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बैक्टीरिया स्ट्रीकिंग के लिए तीन उपकरणों की आवश्यकता होती है: एक अगर प्लेट, एक अल्कोहल बर्नर और एक वायर लूप। अगर प्लेट ग्रोथ मीडिया है जिसमें शोरबा में बढ़ने के बाद बैक्टीरिया को स्थानांतरित किया जाता है। अल्कोहल बर्नर वायर लूप को स्टरलाइज़ करने के लिए एक छोटा, अल्कोहल से भरा लैंप है - एक छोर पर लगे आग प्रतिरोधी तार के एक छोटे लूप के साथ एक लंबा, पतला हैंडल। जब बैक्टीरिया को शोरबा से अगर प्लेट में स्थानांतरित किया जाता है तो लूप बैक्टीरिया से भरे शोरबा की एक छोटी बूंद को पकड़ लेगा।

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एक अग्र प्लेट में बैक्टीरिया फैलाना सरल है, लेकिन आपको यह चरण सही ढंग से करना चाहिए अन्यथा आप अलग कॉलोनियों को अलग नहीं करेंगे। तार को जीवाणुरहित करने के लिए अल्कोहल बर्नर पर लूप गरम करें, फिर लूप की नोक को शोरबा में डुबो दें। अगर प्लेट के एक चौथाई हिस्से पर लूप टिप को कई बार आगे-पीछे करें। लूप को फिर से स्टरलाइज़ करें, और पहली स्ट्रीक्स के आर-पार और लंबवत स्ट्रीक करें। प्लेट के एक नए खंड पर लूप को कई बार आगे-पीछे करें। टिप को स्टरलाइज़ करें। आखिरी स्ट्रीक वाले सेक्शन में एक बार हल्के से स्ट्रीक करें और लूप को कई बार आगे-पीछे करें। स्ट्रीकिंग शोरबा की प्रारंभिक बूंद को उस बिंदु तक पतला कर रही है जहां अंतिम धारियों में एकल कॉलोनियां होंगी। प्लेट को इनक्यूबेटर में या टेबलटॉप पर कमरे के तापमान पर रखें, और कालोनियों के रात भर बढ़ने की प्रतीक्षा करें। अंतिम स्ट्रीक में एकल कॉलोनियां एकल जीवाणु की पृथक कॉलोनियां बन जाएंगी।