एंजाइमैटिक परख की पहली टेस्ट ट्यूब से डेटा के लिए उत्पाद एकाग्रता बनाम समय का एक चार्ट प्लॉट करें। नोट: क्षैतिज अक्ष "समय" होना चाहिए और ऊर्ध्वाधर अक्ष "उत्पाद एकाग्रता" होना चाहिए।
खंड 1, चरण 1 में आपके द्वारा प्लॉट किए गए डेटा बिंदुओं के लिए रैखिक प्रतिगमन रेखा की गणना करें। जबकि एक्सेल और रेखांकन कैलकुलेटर इस रैखिक मॉडल को आसानी से निर्धारित कर सकते हैं, आप प्रतिगमन का अनुमान प्राप्त कर सकते हैं आसन्न डेटा बिंदुओं के बीच उत्पाद एकाग्रता में अंतर को उनके समय के अंतर से विभाजित करके लाइन की ढलान।
"प्रारंभिक प्रतिक्रिया वेग (Vo)" के रूप में धारा 1, चरण 2 से रेखीय प्रतिगमन रेखा के ढलान को रिकॉर्ड करें। नोट: प्रतिगमन रेखा मॉडल में "[उत्पाद एकाग्रता] = एम [समय] + बी," गुणांक "एम" है" ढलान
परख में बाकी टेस्ट ट्यूबों के लिए चरण 1, 2 और 3 दोहराएं।
प्रत्येक परखनली के लिए सब्सट्रेट सांद्रता के व्युत्क्रम को इसकी प्रारंभिक प्रतिक्रिया वेग के विपरीत प्लॉट करें (धारा 1, चरण 4 से)। उदाहरण के लिए, यदि एक परखनली के लिए प्रारंभिक वेग 50 माइक्रोमोलर की प्रारंभिक सब्सट्रेट सांद्रता के साथ है (यूएम) ८० uM/s था, व्युत्क्रम सब्सट्रेट एकाग्रता के लिए १/५० uM और प्रारंभिक के लिए १/८० uM/s होगा वेग। नोट: उलटा सब्सट्रेट एकाग्रता क्षैतिज अक्ष पर होना चाहिए, और उलटा प्रारंभिक वेग ऊर्ध्वाधर अक्ष पर होना चाहिए।
नोट: सब्सट्रेट एकाग्रता क्षैतिज अक्ष पर होना चाहिए, और प्रारंभिक प्रतिक्रिया वेग ऊर्ध्वाधर अक्ष पर होना चाहिए।
धारा 2, चरण 1 में आपके द्वारा बनाए गए चार्ट के लिए रेखीय प्रतिगमन रेखा निर्धारित करें। नोट: क्योंकि आपको प्रतिगमन रेखा के लिए y-प्रतिच्छेदन जानने की आवश्यकता होगी, आपको बिंदुओं को दर्ज करना चाहिए धारा 2, चरण 1 या तो एक्सेल या ग्राफिंग कैलकुलेटर में और बिल्ट-इन रिग्रेशन मॉडलिंग का उपयोग करें कार्यक्षमता।
रैखिक समाश्रयण रेखा से 1 को y-प्रतिच्छेद से विभाजित करें। यह आपको Vmax के व्युत्क्रम का मान देगा, एंजाइम के लिए अधिकतम प्रतिक्रिया वेग। नोट: यदि रेखीय प्रतिगमन मॉडल "[उलटा Vo] = m [उलटा सब्सट्रेट Conc.] + b" का रूप लेता है, तो "b" का मान y-प्रतिच्छेद होगा। Vmax के व्युत्क्रम की गणना करने के लिए 1 को "b" से विभाजित करें।
Vmax के वास्तविक मूल्य की गणना करने के लिए धारा 2, चरण 3 के परिणाम से 1 को विभाजित करें।
मूल परख में एंजाइम की सांद्रता निर्धारित करें (कच्चा डेटा देखें)। नोट: सभी टेस्ट ट्यूबों के लिए एंजाइम एकाग्रता समान है; केवल सब्सट्रेट सांद्रता परख में भिन्न होती है।
एंजाइम एकाग्रता (धारा 2, चरण 5 से) द्वारा Vmax (धारा 2, चरण 4 से) को विभाजित करें। परिणाम Kcat का मान है।
शिकागो स्थित कॉपीराइटर, एंडी पासक्वेसी के पास ऑटोमोटिव (बीएमडब्ल्यू, मिनी कूपर, हार्ले-डेविडसन), वित्तीय सेवाओं (आइवी फंड्स, विलियम ब्लेयर, टी. रोवे प्राइस, सीएमई ग्रुप), हेल्थकेयर (एबॉट) और कंज्यूमर गुड्स (सोनी, मोटोरोला, नॉल) क्लाइंट। उन्होंने हार्वर्ड विश्वविद्यालय से अंग्रेजी में कला स्नातक की उपाधि प्राप्त की है लेकिन ऑक्सफोर्ड अल्पविराम की परवाह नहीं करते हैं।