Entsyymit ovat proteiinimolekyylejä, jotka saavat tietyn muodon, jonka avulla ne voivat nopeuttaa biokemiallisia reaktioita kehossa, käyttäytyen siten katalysaattorina. Entsyymin toiminnan nopeus riippuu suuresti useista keskeisistä muuttujista, joihin kuuluvat lämpötila, pH ja konsentraatio.
Entsyymiaktiivisuudella on vahva suhde lämpötilaan. Lämpötilan noustessa myös entsyymiaktiivisuus kasvaa, koska reagoivien molekyylien ja entsyymien törmäysten määrä kasvaa. Lämpötilan nostaminen johtaa edelleen entsyymiaktiivisuuden huippuun. Ihmisen entsyymien osalta tämä huippulämpötila on noin 98,6 Fahrenheit-astetta, joka on kehomme lämpötila. Lämpötilan jatkuva nousu johtaa entsyymiaktiivisuuden laskuun. Tämä johtuu entsyymiproteiinin denaturoinnista, joka on molekyylisidosten katkeaminen proteiinissa. Kun nämä sidokset katkeavat, entsyymin muoto muuttuu eikä se enää toimi kunnolla katalysaattorina.
Liuoksen happamuuden tai emäksisyyden mittausta kutsutaan pH: ksi. Entsyymit ovat kehittyneet toimimaan tietyillä pH-arvoilla, ja poikkeama tästä arvosta johtaa entsyymiaktiivisuuden vähenemiseen. Tämä johtuu siitä, että korkea tai matala pH voi denaturoida entsyymejä aivan kuten korkeat lämpötilat. Suurimmalla osalla ruumiinnesteistämme neutraali pH on noin 7,2, joten ihmisen entsyymeillä on korkein aktiivisuus tässä pH: ssa.
Substraatti on molekyyli, jota entsyymi toimii. Koska entsyymit voivat sitoutua vain yhteen substraattiin kerrallaan, niiden aktiivisuus riippuu substraatin konsentraatiosta. Substraattikonsentraation alkuvaiheen kasvu johtaa entsyymiaktiivisuuden lisääntymiseen, koska se tarkoittaa, että enemmän substraatteja ja entsyymejä voi muodostua pariksi. Substraatin konsentraation lisäys ei yleensä lisää aktiivisuutta, koska entsyymit ovat kyllästettyjä substraatilla. Toisin sanoen on olemassa rivi, jonka substraattien on odotettava, ennen kuin ne saavuttavat entsyymin.
Entsyymiaktiivisuus riippuu myös suuresti sen omasta molekyylipitoisuudesta. Kun otetaan huomioon mielivaltaisesti suuri substraatin pitoisuus vakio-pH: ssa ja lämpötilassa, mikä tahansa entsyymikonsentraation kasvu johtaa aktiivisuuden lisääntymiseen. Tämä johtaa lineaariseen suhteeseen, jossa entsyymiaktiivisuus on suoraan verrannollinen entsyymikonsentraatioon.