Vöötplaadi eraldamise tehnikad

Kuigi neid ei saa palja silmaga näha, on baktereid kõikjal. Nad eksisteerivad toidus, mullas, vees, meie kodudes ja kehas ning meie kehal. Bakterid esinevad üldiselt segapopulatsioonides. Konkreetse bakteri eraldamine antud proovis teistest bakteriliikidest võimaldab mikrobioloogidel uurida selle struktuuri ja funktsiooni, identifitseerimisel kasutatud omadusi. Mikrobioloogid eraldavad bakterid sageli, kasutades ühte mitmest vöötplaaditehnikast.

Mikroorganismide ülekandmiseks kasutatakse inokuleerivat silmust. See koosneb nikroom- või plaatinajuhtmest, mille ühes otsas on väike ümmargune aas. Teine ots on sirge ja libiseb käepidemesse. Saadaval on ka plastikust ühekordsed inokuleerimisaasad. Baktereid saab eraldada ainult siis, kui nad kasvavad. Mikrobioloogid kasvatavad baktereid triibuplaatide eraldamiseks madalates ümmargustes Petri tassides, mis on täidetud tahke keskkonnaga, mida nimetatakse agariks. Agar jäljendab keskkonda, kus bakterid loomulikult kasvavad. Meediumiga täidetud nõud on steriilsed ja kaanega kaetud, et vältida soovimatute organismide kasvu. Triibuplaadi isoleerimise ajal steriliseeritakse inokuleeriv silmus korduvalt Bunseni põleti leegis.

Triibuplaadi tehnika on populaarseim meetod konkreetsete bakterite eraldamiseks mikroorganismide segu sisaldavast proovist. Tehnika lahjendab oluliselt organismide arvu ja vähendab nende tihedust. See võimaldab mikrobioloogidel eristada ja isoleerida üksikuid bakterikolooniaid. Koloonia on nähtav bakterikobar. Kõik ühe koloonia bakterid pärinevad samast bakterirakust. Järelikult on üksikud kolooniad “puhtad” kolooniad. Puhas koloonia viiakse teisele plaadile, et saada puhas kultuur, mis koosneb ühte tüüpi bakteritest.

Kui see on korralikult tehtud, hõreneb plaadiga eraldamine proovi ja võimaldab üksikutel bakterirakkudel areneda isoleeritud kolooniateks. Mikrobioloog alustab inokuleeriva aasa steriliseerimisega leegis. Ta jahutab silmust, puudutades seda agarile, kasta silmus proovi ja levitab seda edasi-tagasi, et katta osa plaadist. Ta steriliseerib aasa, jahutab seda ja inokuleerib lohistades plaadi teise külgneva osa silmus läbi esimese sektsiooni mitu korda ja teise sektsiooni katmine siksakiga liikumine. See korjab esimesest sektsioonist väikese arvu baktereid ja viib need teise sektsiooni. Selle põhiprotseduuri kordamiste arv sõltub kasutatud triibuplaadi meetodist. Hoolimata meetodist kasutatakse algset proovi ainult plaadi esimese osa inokuleerimiseks.

Triibuplaatide meetodid varieeruvad triibuliste agarlõikude arvu järgi. T-triibulises meetodis kasutatakse kolme osa: ülemist poolt ja kahte võrdse suurusega alaosa. Esialgne inokulaat asetatakse plaadi ülemisse poolde. Bakterid lohistatakse ülemisest osast ühte alumisest osast, seejärel sellest alumisest osast teise. Kvadrandimeetodil on triibulised neli võrdse suurusega sektsiooni. Pideva triibutamise meetod hõlmab tavaliselt plaadi ülemise poole inokuleerimist, pöörates seda 180 kraadi, ja inokuleeritakse plaadi teine ​​pool ilma silmusest steriliseerimata või eelmisest baktereid lohistamata jaotises.