Ensüümid on valgumolekulid, mis omandavad kindla kuju, mis võimaldab neil kiirendada biokeemilisi reaktsioone kehas, käitudes seetõttu katalüsaatorina. Ensüümi töötamise kiirus sõltub suurel hulgal võtmemuutujatest ja nende hulka kuuluvad temperatuur, pH ja kontsentratsioon.
Ensüümide aktiivsusel on tugev seos temperatuuriga. Temperatuuri tõustes suureneb ka ensüümide aktiivsus, kuna reageerivate molekulide ja ensüümide kokkupõrgete arv suureneb. Temperatuuri tõstmine viib veelgi ensüümi aktiivsuse tipuni. Inimensüümide puhul on see tipptemperatuur umbes 98,6 kraadi Fahrenheiti, mis on meie kehatemperatuur. Iga edasine temperatuuri tõus viib ensüümi aktiivsuse vähenemiseni. See on tingitud ensüümi valgu denatureerimisest, mis on valgusiseste molekulaarsete sidemete purustamine. Kui need sidemed purunevad, muutub ensüümi kuju ja see ei toimi enam korralikult katalüsaatorina.
Lahuse happesuse või leeliselisuse näitajat nimetatakse pH-ks. Ensüümid on arenenud töötama konkreetsete pH väärtuste juures ja kõrvalekalle sellest väärtusest põhjustab ensüümi aktiivsuse vähenemist. Seda seetõttu, et kõrge või madal pH võib denatureerida ensüüme täpselt nii, nagu seda teevad kõrged temperatuurid. Enamiku meie kehavedelike neutraalne pH on umbes 7,2, seetõttu on inimese pHensüümidel selle pH juures kõrgeim aktiivsus.
Substraat on molekul, millel ensüüm töötab. Kuna ensüümid saavad korraga seonduda ainult ühe substraadiga, sõltub nende aktiivsus substraadi kontsentratsioonist. Esialgne substraadi kontsentratsiooni suurenemine viib ensüümi aktiivsuse suurenemiseni, kuna see tähendab, et rohkem substraate ja ensüüme saavad paaris olla. Substraadi kontsentratsiooni edasine suurenemine tavaliselt aktiivsust ei suurenda, kuna ensüümid on substraadiga küllastunud. Teisisõnu on olemas rida, milles substraadid peavad enne ensüümi jõudmist ootama.
Ensüümide aktiivsus sõltub suuresti ka tema enda molekulaarsest kontsentratsioonist. Arvestades suvaliselt suurt substraadi kontsentratsiooni püsiva pH ja temperatuuri korral, põhjustab ensüümi kontsentratsiooni suurenemine aktiivsuse suurenemist. See viib lineaarse seoseni, kus ensüümi aktiivsus on otseselt proportsionaalne ensüümi kontsentratsiooniga.