Der Hauptgrund, warum Sie eine Probe färben, bevor Sie sie unter das Mikroskop legen, ist, sie besser sehen zu können, aber die Färbung bewirkt viel mehr, als nur die Umrisse von Zellen hervorzuheben. Einige Farbstoffe können Zellwände durchdringen und Zellbestandteile hervorheben, was Wissenschaftlern helfen kann, Stoffwechselprozesse zu visualisieren. Flecken helfen auch, zwischen lebenden und toten Zellen zu unterscheiden. Darüber hinaus ermöglicht die Färbung den Wissenschaftlern, die Anzahl der Zellen eines bestimmten Typs innerhalb einer bestimmten Biomasse zu zählen. Es gibt zwanzig oder mehr verschiedene Arten von Flecken, und jeder hat seinen Zweck.
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Der Hauptzweck der Färbung besteht darin, Zellen und Zellteile hervorzuheben. Es gibt über 20 verschiedene Arten von Flecken, und die Art des Flecks, den Sie verwenden, hängt davon ab, wonach Sie suchen.
Arten von Flecken
Die Wahl des Flecks hängt davon ab, wonach Sie suchen. Nicht alle Farbstoffe sind für lebende Zellen geeignet, aber zu denen gehören Bismarck-Braun, Toluol-Rot, Nil-Blau und Nil-Rot sowie bestimmte Fluoreszenzstoffe, die verwendet werden, um DNA hervorzuheben. Manche Flecken heben Sporen hervor, manche weisen Lipide und Proteine nach und manche ändern ihre Farbe in Gegenwart von Stärke. Der Zweck der Untersuchung bestimmt die beste Art der zu verwendenden Beize. Zum Beispiel würde ein Arzt, der einen PAP-Abstrich durchführt, Eosin Y verwenden. Es ist ein saurer Fluoreszenzfarbstoff, der rot wird, wenn er mit roten Blutkörperchen, Zytoplasma und Zellmembranen in Kontakt kommt. Es wird auch verwendet, um Blutmark zu testen.
In einigen Fällen kann ein Untersucher mehr als einen Farbstoff verwenden. Hämatoxylin ist beispielsweise ein Farbstoff, der die Zellkerne blau färbt. In Verbindung mit Eosin, das die anderen Zellteile rot oder rosa färbt, sorgt es für einen stärkeren Kontrast und erleichtert die Differenzierung der Kerne. PAP-Abstriche und Blutmarkproben sind leichter zu untersuchen, wenn diese beiden Farbstoffe zusammen verwendet werden.
Grams Fleck: Krankenhausmitarbeiter verwenden die Gram-Färbung, um schädliche Bakterien zu identifizieren. Dies ist eigentlich eine Reihe von Farbstoffen, die unterschiedliche Wirkungen auf verschiedene Arten von Bakterien haben und Ärzten ein wichtiges diagnostisches Werkzeug bieten. Die Gram-Färbung ist ein dreiteiliger Prozess. Im ersten wird Huckers Kristallviolett hinzugefügt, das allen Bakterien eine einheitliche violette Farbe verleiht. In der nächsten Stufe wird Jodfärbung hinzugefügt, die bewirkt, dass die Farbe an grampositiven Zellen haftet, bei denen es sich hauptsächlich um Staphylococcus und Streptococcus handelt. Der Farbstoff wird weggewaschen, wobei die Gram-positiven Zellen eine deutliche violette Farbe haben; dann wird ein dritter Farbstoff, Safranine O, eingebracht, um den Kontrast zwischen den Gram-negativen Bakterien und dem Rest des Materials im Objektträger zu verstärken.
Färbeverfahren
Wenn Sie eine Probe auf einem Objektträger vorbereiten, können Sie sie trocken oder nass einbetten, in einen dünnen Schnitt schneiden oder verschmieren. Bei der Verwendung einer Beize ist das übliche Verfahren, das Präparat nass einzubetten, dh einen Tropfen Wasser auf den Objektträger zu geben, das Präparat in das Wasser zu legen und mit einem Deckglas abzudecken. Anschließend tragen Sie die Farbe mit einer Pipette auf eine Ecke des Objektträgers auf und lassen sie durch Kapillarwirkung auf die Probe zu ziehen. Es hilft, ein Papiertuch auf die gegenüberliegende Seite der Rutsche zu legen, um das Wasser anzuziehen. Sobald sich die Färbung über den gesamten Objektträger verteilt hat, ist die Probe zur Untersuchung bereit.