Chitin färben

Eine Mikrobiologin verwendet Chitinfärbung, damit sie Pilze unter dem Mikroskop deutlich sehen kann. Pilze verwenden Chitin als Strukturmaterial in ihren Zellwänden, damit die Färbung die Zellwand gut zeigt. Die Laktophenol-Baumwoll-Blaufärbung ist die häufigste Färbung für Pilze. Das Phenol tötet Mikroorganismen ab und verhindert, dass Pilzenzyme die Zelle zersetzen. Der baumwollblaue Farbstoff färbt das Chitin blau. Die Chitinfärbung ist ein relativ einfaches Verfahren mit kostengünstigen Materialien. Sie können entweder Ihre eigene Farbe herstellen oder kommerziell hergestellte Beize kaufen.

Bereiten Sie eine Lösung von Lactophenol-Baumwollblau vor. Wiegen Sie 0,05 Gramm Baumwollblau-Farbstoff mit einer empfindlichen Waage ab. Mischen Sie den Farbstoff mit 20 Milliliter destilliertem Wasser in einem Reagenzglas und lassen Sie es über Nacht stehen.

Ziehen Sie am nächsten Tag Handschuhe an, bevor Sie die Fleckenvorbereitung beenden. 20 ml Milchsäure in ein Becherglas geben und mit 20 g Phenolkristallen mischen. Rühren, bis sich die Mischung aufgelöst hat. 40 ml Glycerin hinzufügen und mischen. Anschließend die Baumwollblaulösung durch ein Stück Filterpapier in das Becherglas abseihen und gründlich mischen.

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Alternativ können Sie eine handelsübliche Quelle des Flecks verwenden. Lagern Sie den Fleck bei Raumtemperatur.

Beschriften Sie einen Objektträger mit dem Namen oder der Nummer der Probenidentifikation. Geben Sie mit einer sterilen Pipette einen einzelnen Tropfen einer Wasserprobe auf die Mitte des Objektträgers. Geben Sie für eine trockene Probe einen einzelnen Tropfen 70-prozentiger Alkohollösung auf den Objektträger und verwenden Sie dann eine sterile Schleife, um die trockene Probe mit dem Alkohol zu mischen.

Verwenden Sie eine saubere Pipette, um zwei Tropfen des Lactophenol-Baumwollblau-Flecks auf die Mitte des Objektträgers zu geben. Wenn Sie 70 Prozent Alkohol auf dem Objektträger verwenden, tun Sie dies, bevor der Alkohol vom Objektträger verdunstet.

Berühren Sie eine Kante des Mikroskop-Deckglases mit einer Kante der nassen Probenvorbereitung. Lassen Sie den Schlicker vorsichtig auf die Probenvorbereitung fallen und stellen Sie sicher, dass keine Luftblasen unter dem Objektträger eingeschlossen werden. Die gefärbte Probe ist nun bereit für die Untersuchung unter dem Mikroskop.

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