Fem trin til at forberede agar skråninger

Agar er et gelélignende stof, der stammer fra de rensede cellevægge af røde alger. Det tilsættes til mikrobiologiske medier, som er materialer, hvor mikroorganismer dyrkes i laboratorier, for at give stoffet mere en solid struktur. Agar har ingen næringsværdi, så når forskere bruger den til at dyrke mikroorganismer, tilføjer de forskellige næringsstoffer for at øge bakterievæksten i petriskåle eller reagensglas. Når forskere opbevarer bakterier i et reagensglas, betegnes det som en agarhældning, fordi det flydende vækstmedium størkner, mens røret er i en skrå position. En skruehættetop på skråningen forhindrer agar i at tørre ud.

Mediet fremstilles forskelligt til skråninger end petriskåle. Sterilisering udføres med agar i rørene; petriskåle præsteriliseres, før steriliseret agar hældes i dem. Mål den nødvendige mængde vand og læg den i en Erlenmeyer-kolbe. Varm det på et komfur, indtil det næsten koger. Tilsæt andre ingredienser, hvis det er nødvendigt, og rør blandingen langsomt og konstant, indtil de opløses. Disse ingredienser kan omfatte okseekstrakt, pepton- og pH-buffere afhængigt af typen af ​​mikroorganisme, der dyrkes.

Inden du tilsætter det dehydrerede agarpulver, skal du blande det med en lille mængde koldt destilleret vand for at forhindre klumper. Vær forsigtig, når du tilsætter agar til den varme væske, da den kan skumme og løbe over gryden. Tilsæt små mængder agar ad gangen og rør for at fordele agaren jævnt. Sluk for varmen, når blandingen begynder at dampe, før den koger.

Placer de ikke-lukkede reagensglas på et prøverørstativ. Fyld reagensglasene ved at overføre ca. 5 milliliter - ca. 0,17 ounce eller 1 tsk - af den smeltede agar fra gryden ved hjælp af en steril pipette. Hæt hver af reagensglasene løst, da agaren ikke steriliseres, hvis de er tæt forseglet. Steriliser alle rørene i en autoklave i ca. 25 minutter ved 121 grader Celsius eller 250 grader Fahrenheit.

Når agaren stadig er varm, skal du forsigtigt vippe stativet, der holder reagensglasene på en fast overflade eller en tyk bog, og sørg for, at mediet inde i rørene er skråtstillet i forhold til testen rør. Lad mediet køle af og størkne i denne vinkel, hvilket øger agarets overfladeareal. Stram reagensglassets hætter, efter at agaren er afkølet. Skråningerne er klar til brug, når agaren er størknet. De kan opbevares ved stuetemperatur eller i køleskabet til fremtidig brug.

Inokuler skråningen ved at overføre celler med en inokulerende sløjfe fra en enkeltkolonimikroorganisme på en plade til skråfladen. Flyt sløjfen på tværs af overfladen af ​​skråningen, og sæt rørene sammen igen. Inkuber hældningen, indtil der er tegn på vækst, og sæt derefter røret i køleskab.

  • Del
instagram viewer