Forskere og forskere studerer bakterievækst ved at forberede kulturer i et laboratorium. Petriskåle indeholdende næringsagar dyrker bakteriekulturer fra en enkelt strygning eller podning. Studerende kan forberede næringsagar derhjemme ved hjælp af forsyninger fra dagligvarebutikker eller helsekostforretninger til et videnskabsmesse-projekt. Konventionelle køkkenapparater og grundlæggende køkkenudstyr giver værktøjerne til at forberede et sterilt dyrkningsmedium, der kan dispenseres i petriskåle. At følge sterile teknikker ved at opvarme materialerne og holde overfladerne rene og tørre forbedrer resultaterne ved at forhindre skimmel og partikler i at forurene kulturen.
Anbring et kaffefilter i et filter, og hæng filtret over åbningen af den klare skål.
Hæld langsomt bouillon i filteret, og sørg for, at bouillon ikke løber over fra siderne på filteret. Hvis filteret bliver tilstoppet med partikler, skal du fjerne det brugte filter, udskifte det med et rent filter og fortsætte med at hælde bouillon.
Fjern silen og filteret fra toppen af skålen, og observer, om bouillon ser ud til at være klar (dvs. der er ingen suspenderede partikler i væsken). Hvis partikler flyder i væsken, skal du gentage trin 1 og 2 med en anden klar skål og et nyt kaffefilter.
Placer gryden på komfuret og hæld den klare bouillon i gryden.
Tilsæt 16 ounce destilleret vand til gryden, der indeholder bouillon.
Tænd for ovnen, og juster varmen til medium-lav. Varm bouillon til en simmer (dvs. små bobler vises nær siden af gryden).
Tilsæt 1 tsk agar-agar pulver til den kogende bouillon (ca. 2,5 gram), og rør blandingen, indtil pulveret er opløst. Sørg for at omrøre pulveret for at opløse det og forhindre gelatinen i at synke ned i bunden af gryden (hvor det kan brænde).
Gentag trin 7, indtil alt agar-agarpulver er opløst i bouillon.
Fortsæt omrøring af bouillon i ca. 1 minut for at sikre, at alt pulver er helt opløst.
Sluk for ovnen, læg låget på gryden, og lad væsken køle af i mindst 15 minutter.
Arranger de sterile petriskåle i række for nem montering, men fjern ikke lågene. Hvis det ønskes, skal du placere en trivet for at holde den varme gryde. Hvis du bruger vanillecrudekopper i stedet for petriskåle, skal du sterilisere kranekagerne ved at placere kopperne og lågene. inverteret (på hovedet) på et foliedækket cookie-ark og bages i ovnen i mindst en time ved 375 grader Fahrenheit. Sørg for, at de steriliserede kopper og låg er afkølet helt inden brug.
Rør forsigtigt ydersiden af gryden for at kontrollere, at den er varm at røre ved, og placer gryden på nitten. Hvis gryden er for varm til at røre ved, skal du vente mindst 10 minutter for at lade gryden køle af.
Fjern låget og læg det til side. Anbring sleiven i gryden.
Fjern låget fra en petriskål og dispens næringsvæske til at fylde skålen halvvejs. Dæk fadet straks med dækslet.
Gentag trin 14 for hver af petriskålene.
Lad næringsvæsken størkne i petriskålene i mindst 1 time uforstyrret.
Ryst petriskålene forsigtigt side om side for at kontrollere, at næringsvæsken er størknet fuldstændigt. Hvis bouillon ikke er helt geleret, skal du vente yderligere 20 minutter, før du kontrollerer det igen.
Dæk et bord eller en flad overflade med en rulle papirhåndklæder for at skabe et sterilt arbejdsområde. Riv et ark papirhåndklæde af, og fold det fire gange for at skabe et tykt, rektangulært stykke. Sæt dette stykke i den ene ende af arbejdsområdet.
Overfør en petriskål til det sterile arbejdsområde, og fjern låget. Vend skålen forsigtigt om, og placer den ene ende på siden af det foldede vad, så det ligger omvendt og let vinklet (med et lille hul i papirhåndklædet).
Vend låget om og placer det over petriskålen på den sterile arbejdsflade. Hvis der vises vanddråber på låget, skal du ryste denne fugt forsigtigt af, inden den placeres på den overdækkede overflade, men rør ikke ved indersiden af låget.
Gentag trin 19 og 20 for hver petriskål, og placer den ene side af den omvendte skål på siden af den forrige skål i stedet for papirhåndklædet. Opvasken vises som et forskudt sæt med huller på den ene side, så overskydende fugt kan fordampe.
Se på de omvendte petriskåle for at kontrollere, om fugtigheden på siderne af pladerne er fordampet. Når al fugt er ryddet, skal du dreje pladerne med højre side op og straks dække med låg til brug.
Inokuler næringsagar på pladen ved at tørre en vatpind indeholdende den ønskede kultur på næringsagaroverfladen, inden den dækkes med låget. Vend petriskålen om, så det faste stof er på toppen. Opbevar den inokulerede petriskål med det faste stof på toppen til dyrkning og låget i bunden for at fange fugt, løse partikler eller vækst.
Ting, du har brug for
- Kaffefiltre
- Sil
- 2 store, klare skåle
- 16 oz. fedtfri oksekød bouillon
- 16 oz. destilleret vand
- Gryde med låg
- Komfur
- 10 gram agaragar
- Måleske
- Omrører
- Rulle papirhåndklæder
- Grydeholdere
- Metal slev
- Sterile petriskåle eller klare vaniltekopper med låg
- Valgfrit: timer, trivet, ovn, gryde, aluminiumsfolie, gryde
Tips
Hvis der vises overdreven fugt på lågene, skal du tørre og sterilisere lågene i ovnen indstillet til 375 grader Fahrenheit i mindst 1 time (sørg for at placere lågene i en ren gryde foret med aluminiumsfolie, inden du lægger dem i ovn).
Advarsler
-
Vær forsigtig, når du håndterer den varme gryde for at undgå forbrændinger. Hvis siden af gryden er for varm, er væsken i gryden meget varm. Næringsvæskekraften skal være varm til dispensering i opvasken, men ikke for varm til at producere overdreven kondens i petriskålene under afkøling og hærdning.
Rør ikke ved indersiden af petriskålen (dvs. plade eller låg) for at undgå at indføre uønskede bakterier i kulturen.
