Når du tester effekten af pH på enzymaktivitet, skal du variere pH. Du kan dog gøre dette på gode eller dårlige måder. Husk, hvilke ekstra faktorer der kan forvirre virkningerne af varierende pH. Ellers skyldes de opnåede resultater muligvis ikke ændringen i pH, men en anden faktor. At vide, hvordan man korrekt varierer pH, og hvilke faktorer der forveksler et eksperimentets pH, hjælper dig med at få gode resultater og forstå, hvorfor dine resultater muligvis ikke er nøjagtigt det, du forventede.
Skift kun en ting
Når du tester effekten af pH på enzymaktivitet, skal du kun variere pH, mens du holder andre faktorer konstant. Disse andre faktorer inkluderer enzymkoncentration, substratkoncentration og temperatur. De faktorer, der forbliver konstante, kaldes kontrolvariablerne. Kontrolvariabler giver dig mulighed for at konkludere, at resultaterne af enzymaktivitet opnået i dit eksperiment skyldes variationen i pH, den uafhængige variabel. At vide, hvilke faktorer der ikke skal ændres i et eksperiment, er lige så vigtigt som at vide, hvilken faktor der skal variere, ellers vil det være vanskeligt at konkludere, om resultaterne faktisk skyldes den ene ting, der var testet.
Vælg en syre eller en base
PH i en opløsning kan ændres ved at opløse forskellige mængder af en syre eller en base i vand. En måde at teste effekten af pH på enzymaktivitet på er gradvist at tilsætte dråber af en stærk syre eller en stærk base i opløsningen, der indeholder enzymet, og observer derefter det punkt, hvor enzymaktivitet sænkes ned eller stopper. En syre er defineret som en forbindelse, der donerer en hydrogenion, kaldet en proton (H +), og en base er defineret som en forbindelse, der donerer en hydroxidion (-OH). Forskellige syrer og baser har forskellige antal protoner eller hydroxidioner at give væk. Ikke alle protoner eller hydroxidioner doneres straks, når en syre eller base tilsættes til en opløsning, men antallet af donerede protoner eller hydroxidioner ændrer pH ved forskellige hastigheder. Det er således en god ide at variere pH i et enzymeksperiment ved kun at bruge en syretype eller en type base. Ellers tilføjes andre variabler utilsigtet.
Væv ændrer også pH
Nogle laboratorieeksperimenter, der studerer enzymaktivitet, involverer formaling af frisk væv for at frigøre enzymerne fra cellerne og derefter tilføje substrat for at måle enzymaktivitet. Frisk væv indeholder blod. På grund af tilstedeværelsen af enzymer i blod, der ændrer kuldioxidgassen, der er opløst i blodet til kulsyre, kan vævet i sig selv påvirke pH. I eksperimenter, der involverer enzymaktivitet i frisk væv, er det således nyttigt at vaske blodet af i et bæger med koldt vand, før vævet formales. Dette minimerer den utilsigtede ændring af pH på grund af vævet, så den målrettede ændring i pH kan undersøges.
Hold størrelserne ens
Som diskuteret ovenfor er enzymkoncentration en kontrolfaktor, der ikke bør varieres, når man tester pH-effekten på enzymaktivitet. Imidlertid varierer eksperimentelle procedurer stadig iboende enzymkoncentration på subtile måder. Hvis man bruger en ren opløsning af enzymer, skal man holde enzymkoncentrationen konstant. I eksperimenter, hvor enzymet er fra frisk væv, såsom stykker kartoffel, stykker planter eller leverstykker, ændrer størrelsen af bidder imidlertid mængden af enzym i hvert reagensglas. Således vil det være nyttigt at skære vævstykkerne så ensartet som muligt. Dette er et andet eksempel på, hvordan det at vide, hvad man ikke skal ændre, og hvorfor det er svært ikke at undgå ændringer helt, hjælper med at fortolke resultaterne af at variere en faktor som f.eks. PH.