De fleste videnskabelige glasvarer kræver periodisk omkalibrering eller i det mindste verifikation af deres tidligere kalibrering. Metoden til kalibrering af graduerede cylindre afhænger af typen af cylinder. Graduerede cylindre er mærket enten TC, hvilket betyder "at indeholde" eller TD, hvilket betyder "at levere." For en TC cylinder, repræsenterer volumenaflæsningerne markeret på siden den mængde væske, der er indeholdt i cylinder. Denne mængde vil afvige fra det volumen, som cylinderen faktisk leverer, når væsken overføres til en anden beholder. Et par dråber væske forbliver normalt i cylinderen, og dette væskevolumen er taget i betragtning for en cylinder, der er kalibreret TD.
Kalibreringsmetoden er baseret på måling af vandmængder og derefter bestemmelse af massen af det vand, der blev målt. Vand udviser en densitet på 1,00 gram pr. Milliliter (g / ml) nær stuetemperatur. Dette betyder, at hver 1,00 ml vand skal veje 1,00 g. En cylinder indeholdende 5,0 ml vand skal således indeholde 5,0 g vand.