Bakterie jsou jedny z nejhojnějších organismů na Zemi. Vědci odhadují, že je konec jeden bilion různých druhů bakterií ve výši více než pět milionů bilionů bilionů (ano, to jsou dva samostatné biliony) jednotlivců na planetě.
Ze všech těch bakterií však méně než 1 procento způsobit onemocnění u lidí. Tyto nemoci se mohou pohybovat od žaludečních obtíží, jak se můžete dostat od mírné infekce, po vážná a smrtelná onemocnění, jako je dýmějový mor (způsobený Yersinia pestis bakterie), které ve 14. století zabily 50 milionů lidí.
Proto objev antibiotik, což jsou léky, které eliminují bakterie, zachránil tolik životů. Potíž s bakteriemi spočívá v tom, že se velmi rychle adaptují a vyvíjejí, což vede k tomu, že kmeny bakterií rezistentních na antibiotika jsou stále běžnější. Měření zóna inhibice protože kmen bakterií může vědcům a lékařům říci, zda je rezistentní na antibiotikum.
Antibiotika a jak fungují
Antibiotika jsou léky, které ničí bakterie. Fungují tak, že se zaměřují a vedou ke smrti bakteriálních buněk, zatímco nechávají vaše lidské buňky samy. Každé antibiotikum funguje trochu jiným způsobem, a to tak, že se zaměřuje na struktury specifické pro bakterie a signalizuje jejich eliminaci.
Například penicilin (jedno z nejznámějších antibiotik) interferuje s buněčnými stěnami bakterií, což vede k tomu, že nefungují správně, a tak umírají. Léky, které fungují takto, se nazývají beta-laktamová antibiotika.
Makrolidová antibiotika cílové bakteriální ribozomy. To zabrání bakteriím v syntéze bílkovin, což znamená, že bakterie nemohou přežít. Běžným příkladem je erythromycin, antibiotikum, které se používá k léčbě různých infekcí, včetně bronchitidy a řady kožních infekcí.
Chinolonová antibiotika jsou dalším běžným typem antibiotika, která působí interferencí s bakteriální DNA.
Testování rezistence na antibiotika
Po počátečním objevu antibiotik ve 20. letech si vědci rychle uvědomili, že bakterie jsou se vyvinul tak, aby byl odolný vůči lékům. Mnoho vědců se poté pokusilo vytvořit metody, které by jim umožnily otestovat, jak jsou bakteriální kmeny náchylné k antibiotikům, aby pochopily, s čím se tak řečeno potýkají.
Počáteční testy zahrnovaly sériová ředění bakteriálního bujónu šířeného na plotny s různými koncentracemi antibiotika, aby se stanovila citlivost. Tato metoda však trvala dlouho.
Kirby-Bauerův test
To je místo, kde Kirby-Bauerův test přichází v. Tuto metodu standardizovali mikrobiologové W. M. M. Kirby a A. W. Bauer. Jejich test vezme čistou bakteriální kulturu a nanese ji na agarovou desku. Poté se na agarovou destičku umístí malý disk naplněný antibiotiky (vhodně nazývaný disk s antibiotiky). Kolem destičky jsou umístěny různé disky s různými antibiotiky a bakterie jsou ponechány inkubovat po určitou dobu.
Jakmile je disk umístěn na destičku, antibiotika začnou difundovat. Pokud jsou studované bakterie citlivé na antibiotikum, pak v blízkosti disku nebudou růst žádné bakterie, protože budou léky zabity.
Ale jak se budete vzdalovat od disku s antibiotiky, koncentrace antibiotika se sníží. V určité vzdálenosti od disku začnete znovu vidět růst bakterií, protože koncentrace antibiotika je příliš nízká na to, aby ovlivnila bakterie.
Oblast kolem antibiotického disku, která nemá žádný bakteriální růst, je známá jako zóna inhibice. Zóna inhibice je rovnoměrně kruhová zóna bez růstu bakterií kolem disku s antibiotiky. Čím větší je tato zóna, tím citlivější jsou bakterie na toto antibiotikum. Čím menší je zóna, tím jsou bakterie odolnější (a tedy méně citlivé).
Jak měřit zónu inhibice
Vedle pojmenování této praxe a protokolu vytvořili vědci Kirby a Bauer také standardizované grafy použil průměr zóny inhibice k určení citlivosti nebo odolnosti bakterií vůči bakterie.
Tyto grafy lze nalézt tady a použít bakteriální druh, typ použitého antibiotika a zónu průměru inhibice do určit, zda jsou bakterie rezistentní, středně citlivé nebo citlivé na to antibiotikum.
Poznámka: Vždy měříte zónu inhibice v milimetrech.
Chcete-li změřit inhibiční zónu, nejdříve položte destičku na nereflexní povrch. Vezměte pravítko nebo posuvné měřítko, které měří v milimetrech, a vložte „0“ do středu disku s antibiotiky. Změřte od středu disku k okraji oblasti s nulovým růstem. Měření provádějte v milimetrech.
Tím se měří poloměr zóny inhibice. Vynásobte to dvěma, abyste získali průměr.
Můžete také měřit přímo přes zónu inhibice od hrany k hraně procházející středem disku s antibiotiky, abyste naměřili průměr namísto poloměru.