Nutriční agar je druh komplexního média pro všeobecné použití, které se používá hlavně pro kultivaci různých mikroorganismů.
Komplexní média mikrobiologie jsou růstová média, která se skládají z řady dostupných živin a molekul bílkovin v neznámých koncentracích. Živný agar se používá pro kultivaci neškodných mikrobů, jako jsou bakterie a kvasinky.
Co roste na živném agaru?
Mikroorganismy potřebují pro přežití a růst jídlo, vodu a vhodné prostředí. Živný agar poskytuje tyto zdroje pro mnoho typů mikrobů od houby jako kvasinky a plíseň běžným bakteriím, jako jsou Streptococcus a Staphylococcus.
Mikroby, které lze pěstovat na komplexním médiu, jako je výživný agar, lze popsat jako neškodné organismy. Neškodné organismy jsou mikroby, které jsou schopné růst a prospívat bez zvláštních podmínek výživy nebo prostředí.
Některé bakterie nelze pěstovat na živném agaru. Náročné organismy (vybíravé bakterie) může potřebovat velmi specifický zdroj potravy, který není obsažen v živném agaru. Jedním z příkladů náročného organismu je
Treponema pallidumbakterie způsobující syfilis. Vědci se neúspěšně snaží pěstovat tuto bakterii v kultuře již více než 100 let.Živný agar lze použít ke kultivaci mikroorganismů pro různé účely. Jedním z použití je pěstování a údržba specifických kolonií neškodných organismů pro vědecké studium nebo identifikaci. Dalším použitím je detekce a kvantifikace přítomnosti potenciálně škodlivých látek bakterie nebo jiné mikroby ve vodě, odpadních vodách, měkkýších, masu, mléčných výrobcích a jiných potravinářských výrobcích.
Médium musí být udržováno sterilní, aby bylo zajištěno, že jedinými rostoucími mikroby jsou ty, které jsou určeny pro kultivaci, a ne růst v důsledku kontaminace média.
Složky s živným agarem
Hlavní přísady v živném agaru jsou pepton, hovězí extrakt a agar. Tyto přísady se práškují a poté se přidají do destilované vody. Specifické složení živin agar se mohou mírně lišit v závislosti na výrobci a zdroji použitých přísad.
Složení připraveného živného agarového média je 0,5% peptonu, 0,3% hovězího extraktu (nebo kvasnicového extraktu), 1,5% agaru a 0,5% chloridu sodného.
Definovat agar
Chcete-li definovat agar, přemýšlejte o komplexním sacharidu získávaném z mořských červených řas, který působí jako ztuhující činidlo v živném médiu. Nemá žádnou nutriční hodnotu pro kultivaci mikrobů.
Agarové gely při teplotě 113 stupňů Fahrenheita (45 stupňů Celsia) a tají při teplotě 203 stupňů Fahrenheita (95 stupňů Celsia). Agar také zahrnuje potravinářské odrůdy, které lze použít jako zahušťovací přísadu do polévek, želé a dalších potravin.
Definice peptonu
The definice peptonu je rozpustný protein vytvořený v počátečních stádiích štěpení bílkovin během procesu trávení. Vyrábí se částečným strávením proteinových materiálů, jako je maso, želatina a kasein, pomocí kyselin nebo enzymy.
Účelem peptonu v živném agaru je poskytnout primární zdroj organického dusíku pro rostoucí mikrobiální kulturu a může to být také zdroj sacharidů a vitamínů. Přesné složení peptonu v živném médiu se bude lišit v závislosti na zdroji bílkovin a způsobu trávení.
Hovězí extrakt
The hovězí extrakt k výrobě živného agaru se používá směs ve vodě rozpustných částic živočišné tkáně, sacharidů, organických sloučenin dusíku, vitamínů a soli.
Kvasnicový extrakt lze také použít k výrobě výživného agaru a poskytuje podobné sloučeniny. Účelem sloučenin v hovězím extraktu je napomáhat růstu bakterií kultivovaných na živném agaru.
Destilovaná voda
Destilovaná voda se obvykle používá k výrobě živného agarového média. Destilovaná voda je voda, která byla zpracována k odstranění veškerých rozpuštěných kontaminantů a minerálů.
Destilovaná voda přítomná v živném agaru je nezbytná pro životní procesy mikroorganismů, které tam rostou, stejně jako voda je nezbytná pro životní procesy všech živých věcí. Přidáním chloridu sodného do směsi je prostředí kultury podobné cytoplazma.
Příprava živného agaru
Aby bylo možné správně připravte směs živného agaru pro bakteriální kulturu je důležité odkazovat na konkrétní pokyny poskytnuté výrobcem živin. Některé přísady nebo množství se mohou mírně lišit v závislosti na zdroji živného agaru.
- Rozpusťte 28 gramů prášku s živným agarem v jednom litru destilované vody.
- Směs se za stálého míchání zahřívá k varu. Pokračujte v vaření a míchejte směs asi jednu minutu nebo dokud se veškerý prášek nerozpustí.
- Rozpuštěná směs se autoklávuje po dobu 15 minut při teplotě 249,8 stupňů Fahrenheita (121 stupňů Celsia).
- Agarovou směs nechejte mírně vychladnout. Dávkujte do desek nebo zkumavek. Nechte ztuhnout.
- Nasaďte víčka a uložte na chladném, tmavém a sterilním prostředí, například v chladničce. Obchod agarové desky (Petriho misky) obráceně, aby se zabránilo tvorbě kondenzátu na médiu.
Konečné pH připraveného živného agarového média by mělo být 6,8. Médium by mělo mít světle jantarovou barvu a konzistenci pevné želatiny. Připravené živné agarové médium by mělo v chladničce vydržet až dva roky, pokud nedojde k výrazné změně vzhledu média, která by naznačovala kontaminaci.