Technika separace bakterií ve smíšené kultuře

Mikrobiologové, genetici a molekulární biologové používají bakteriální kultury k objevování tajemství života. Mikrobiologové studují bakterie, aby objevili nová antibiotika pro léčbu infekcí. Genetici používají bakterie k určení, zda chemické látky mohou mít karcinogenní vlastnosti. Molekulární biologové studují biochemické dráhy buněčných procesů, aby pochopili funkce enzymů, které máme s bakteriemi společné. Jakkoli jsou studie různorodé, všechny tři vědy izolují bakteriální kultury pomocí stejné techniky: pruhy na agaru.

Základy mikrobů

Mnoho bakterií má výrazné tvary, které usnadňují klasifikaci.

•••Chad Baker / Photodisc / Getty Images

Mikroby jsou jednobuněčné organismy, jako jsou bakterie a houby. Tyto organismy se množí rychle a snadno se pěstují, což je činí zvláště užitečnými pro studium. Když je v přírodě objeven potenciálně nový mikrob, je vzorek umístěn do růstového média zvaného „vývar“. Vývary sestávají ze sterilizované vody, solí, cukrů a dalších živin, které budou podporovat rychlý růst bakterií v baňce během inkubace. Bujón však bude častěji obsahovat ne více než jeden typ bakterií. Aby izoloval jedinou bakterii, vědec rozloží malý vzorek bujónu na polotuhou agarovou desku pomocí mikrobiální techniky zvané „pruhy“.

instagram story viewer

Agarové desky

Noste rukavice při manipulaci s agarovými destičkami, aby nedocházelo ke kontaminaci vzorku bakteriemi z vašich rukou.

•••Comstock / Comstock / Getty Images

Agarové misky jsou poloprůhledné, polotuhé gely skládající se z mořských řas a specifické koncentrace živin. Užitečnost agaru spočívá v tom, že poskytuje hladký a měkký povrch pro růst bakterií. Když vědec umístí jedinou bakterii na agar, bude se množit tisícovým zdvojnásobením a bude vypadat jako malá kolonie jednotlivých buněk.

Nástroje pro šíření bakterií

Základní nástroje pro proudění bakteriálních kolonií se od objevení techniky nezměnily.

•••Photos.com/Photos.com/Getty Images

Pruhování bakterií vyžaduje tři nástroje: agarovou destičku, alkoholový hořák a drátěnou smyčku. Agarová destička je růstové médium, do kterého se bakterie přenesou po pěstování v bujónu. Alkoholický hořák je malá lampa naplněná alkoholem pro sterilizaci drátěné smyčky - dlouhá štíhlá rukojeť s malou smyčkou ohnivzdorného drátu připojenou na jednom konci. Při přenosu bakterie z bujónu na agarovou desku bude smyčka obsahovat malou kapku bujónu naplněného bakteriemi.

Proces šíření bakterií

Cikcakový pohyb je nejúčinnějším způsobem šíření bakterií na agarové plotně.

•••Hemera Technologies / Photos.com / Getty Images

Pruhování bakterií na agarové plotně je jednoduché, ale musíte tento krok provést správně, jinak nebudete izolovat oddělené kolonie. Zahřejte smyčku nad alkoholovým hořákem, aby se drát sterilizoval, a poté špičku smyčky ponořte do vývaru. Několikrát provlékněte špičku smyčky sem a tam na čtvrtinu agarové desky. Znovu sterilizujte smyčku a protáhněte ji napříč a kolmo na první pruhy. Posuňte smyčku několikrát dopředu a dozadu po nové části desky. Sterilizujte špičku. jednou lehce pruhujte napříč posledním pruhem a několikrát posuňte smyčku tam a zpět. Pruhování zředí počáteční kapku vývaru do bodu, kdy poslední pruhy budou obsahovat jednotlivé kolonie. Destičku umístěte do inkubátoru nebo na desku stolu při pokojové teplotě a počkejte, dokud kolonie nevyrostou přes noc. Jednotlivé kolonie v posledním pruhu se stanou izolovanými koloniemi jedné bakterie.

Teachs.ru
  • Podíl
instagram viewer