Existem muitos métodos para separar e identificar diferentes compostos. Cromatografia é a ciência que permite separar os componentes de uma mistura. O Rf (às vezes escrito informalmente como "valor rf") faz parte disso.
Existem muitos tipos diferentes de cromatografia. Aqui, o foco é o tipo mais simples de cromatografia: cromatografia em papel ou cromatografia em camada fina (TLC). Ambos usam o mesmo procedimento geral, que é descrito a seguir.
O que a cromatografia envolve?
Todos os tipos de cromatografia têm um fase estacionária e um na fase móvel. A fase estacionária, como você pode adivinhar pelo nome, não se move. Na cromatografia em papel, a fase estacionária é o próprio papel.
Para iniciar a separação dos compostos, a substância a ser analisada é pontilhada na borda inferior do pedaço de papel. Em seguida, o papel é colocado em um béquer contendo a fase móvel, que é um solvente. O solvente deve estar sob o ponto onde a substância para análise está pontilhada. Não deve submergir o analito.
O líquido sobe no papel por ação capilar. Se o analito ou parte do analito for atraído para a fase móvel, ele se moverá com ele. Se tiver uma atração mais forte para a fase estacionária, ele não se moverá.
Depois que o solvente subiu até certo ponto na fase estacionária, você tem um cromatograma. Este cromatograma informa sobre a separação de diferentes componentes em uma mistura ou sobre a substância que você possui. Como?
Separando e identificando componentes usando um cromatograma
Se as condições para desenvolver um cromatograma forem as mesmas, a distância que uma determinada substância se moverá deve mudar. Esta distância é medida pelo fórmula de fator de retenção ou Rf.
A fórmula do fator de retenção é:
Este valor deve ser o mesmo para uma substância quando o cromatograma é desenvolvido da mesma maneira.
Isso é útil quando você tem uma mistura de substâncias.
Por exemplo, digamos que você tenha quatro amostras: três são padrões e uma é mistura. Seu trabalho é identificar quais componentes estão na mistura.
O que são padrões? Os padrões são uma amostra pura de uma substância. Isso pode ser executado no cromatograma como uma comparação.
A mistura pode ser executada, após o que você pode determinar até que ponto os diferentes componentes são executados.
Digamos que o Padrão # 1 tenha uma grande afinidade com a água (a fase móvel). Isso significa que ele viajará pelo papel com a fase móvel. O padrão # 2, por outro lado, tem uma grande afinidade com o papel. Isso significa que ficará com a fase estacionária. Por último, o Padrão # 3 tem afinidade tanto para água quanto para papel. Você prevê que ele se moverá em uma quantia intermediária.
Você descobre que o solvente se move 5,7 cm, enquanto o Padrão # 1 move-se 0,5 cm, o Padrão # 2 move-se 4,8 cm e o Padrão # 3 move-se 2,9 cm. Quais são os Rf valores para cada padrão?
Agora, você conhece o Rf valores para os padrões. Em seguida, em outro pedaço de papel, você coloca um ponto da mistura e permite que o cromatograma se desenvolva, colocando-o na água.
Uma vez removido, você descobre que há dois pontos separados do ponto inicial que você colocou. Isso provavelmente significa que existem apenas dois componentes em sua mistura. Em seguida, você precisa descobrir a qual dos padrões esses dois componentes correspondem. Para fazer isso, você mede o Rf valores.
O solvente moveu-se 4,5 cm. Um componente (denominado componente 1) moveu-se 2,2 cm e o outro moveu-se 3,9 cm (denominado componente 2). Para ver a qual padrão esses componentes correspondem, você precisará usar a fórmula do fator de retenção para calcular o Rf valores.
Dado estes Rf valores, é provável que o componente 1 corresponda ao Padrão # 3, uma vez que o Rf os valores são muito semelhantes. O Componente 2 é provavelmente o Padrão # 2.